刘通 1,2 , 王贺双 3 , 许凝 2
  • 1. 大连医科大学研究生院(辽宁大连 116044);
  • 2. 大连医科大学附属大连市中心医院 胸外科(辽宁大连 116044);
  • 3. 大连医科大学附属大连市中心医院 中心实验室(辽宁大连 116044);
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目的 探讨程序性死亡受体 1(programmed cell death protein-1,PD-1)单克隆抗体对体外诱导扩增的细胞因子诱导杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK)抗肺癌效应的影响。方法 收集大连市中心医院肿瘤内科 2019 年 1~5 月确诊的 20 例中晚期肺癌患者[男 8 例、女性 12 例,平均年龄 42~65(56.45±5.89)岁]外周血单个核细胞,体外诱导扩增为 CIK 细胞,设 PD-1 单克隆抗体联合 CIK 细胞培养组、单独 CIK 细胞培养组和 PD-1 单克隆抗体组进行实验,采用 CCK-8 法分别检测不同效靶比条件下各组 CIK 细胞对肺癌 A549 细胞杀伤活性,用流式细胞仪检测 PD-1 单克隆抗体联合 CIK 细胞培养组和单独 CIK 细胞培养组穿孔素及颗粒酶表达阳性比例,ELISA 法检测两组白细胞介素 2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)细胞因子分泌水平。结果 CCK8 法检测 CIK 细胞对肺癌 A549 细胞的杀伤效应随效靶比增大而增大,PD-1 单克隆抗体提高了不同效靶比条件下 CIK 细胞对 A549 肺癌细胞的杀伤效应,E∶T 为 5∶1(28.5%±1.9% vs. 20.3%±1.8%)、10∶1(40.6%±2.4% vs. 31.7%±2.1%)、20∶1(57.4%±3.5% vs. 44.7%±3.8%)、40∶1(74.1%±8.3% vs. 60.8%±5.3%),PD-1 单克隆抗体联合 CIK 细胞组和单独 CIK 细胞组在不同效靶比条件下对肺癌 A549 细胞的杀伤效应差异具有统计学意义(P<0.05),两组细胞对肺癌 A549 细胞杀伤效应均强于单独 PD-1 单克隆抗体组(P<0.01)。流式细胞仪检测结果提示抗 PD-1 单克隆抗体提高了 CIK 细胞的干扰素和颗粒酶释放阳性比例,CIK 细胞联合 PD-1 单克隆抗体组与单独 CIK 细胞组干扰素释放阳性比例(46.7%±3.5% vs. 35.1%±2.2%)和二者颗粒酶释放水平(34.6%±3.8% vs.25.7%±3.3%)差异具有统计学意义(P<0.05)。与单独 CIK 细胞组相比,PD-1 单克隆抗体联合 CIK 细胞组提高了 IL-2、TNF-α、IFN-γ 细胞因子的分泌水平[(5 409.0±168.8)pg/mL vs.(4 300.0±132.3)pg/mL,(252.7±16.7)pg/mL vs.(172.5±8.6)pg/mL,(327.2±23.5)pg/mL vs.(209.7±16.0)pg/mL],各组间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 PD-1 单克隆抗体能够促进 CIK 细胞杀瘤物质的释放,提高 CIK 细胞对肺癌 A549 细胞的杀伤效应,推测肺癌患者在进行 CIK 细胞过继治疗前输注 PD-1 单克隆抗体可能更有利于疾病的治疗,PD-1 单克隆抗体联合 CIK 细胞治疗有希望成为一种新型的肺癌免疫疗法。